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            实验室生物安全柜的等级区分及使用注意事项
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                             实验室生物安全柜的等级区分及使用注意事项

                二零零三年的非典给我国的政治、经济、外交及人们的日常生活带来了巨大的冲击,在这场战役中,检验工作者不顾个人的安危,积极投入到抗击非典的战斗中,为取得那场战役的胜利做出了不可磨灭的贡献。同时非典也留给我们很多启示,居安思危,应重视临床实验室所面临的生物安全问题,加强实验室的安全管理势在必行。同年四月二十五日,WHO专门颁布了《WHO关于处理SARS标本的生物安全指南》,对血和尿标本病毒及细胞培养和动物实验做了严格的规定,今年国家卫生部高强部长签发了五十号令,对病原微生物实验室的安全问题做了明确的法规要求,相继出台了一系列的临床实验室安全准则"等文件,并要求各级CDC落实医学实验室安全管理"ISO15190文件。多年来武警部队卫生部一直非常重视实验室的安全管理,尤其是HIV初筛实验室的建设,走在了全国、全军的前列,这次武警部队卫生部又给下属的所有HIV实验室配备了生物安全柜。这对保护工作人员、环境以及保护样本和落实生物安全管理起到了至关重要的作用。下面就将生物安全柜级别、功能及选型和使用注意事项作以说明:

                   1生物安全柜的分级及功能
                生物安全柜分为级(BSL-1)、级(BSL-2)和级(BSL-3)生物安全柜;BSL-2级生物安全柜又分为A型、B型、B2型、B3型。
            生物安全柜其功能如下:BSL-1级生物安全柜可提供人员和环境的保护,但不提供对样本的保护,常被用作特殊的密封设备(如离心),或可能产生气溶胶的操作过程。BSL-2级生物安全柜可提供人员、环境和样本的保护,其中B2型为全排风式生物安全柜,没有空气在安全柜内循环,可同时提供基本的生物和化学防护。BSL-3级生物安全柜可提供人员、环境和样本的最大保护,用于操作四级生物安全水平的微生物或病原体。
                   2生物安全柜的正确选型
                实验室选择生物安全柜时应详细了解从事传染性微生物工作中的生物安全级别所包括的主要要素,根据给个人、环境、社会提供的保护情况选取不同级别的生物安全柜。
                   2.1生物安全一级(BSL-1):适合用于非常熟悉的病源,该病源不会经常引发健康成人疾病,对实验人员和环境潜在危险小,实验室没有必要和建筑物中的一般行走区分开,一般按照标准的分级生物操作在开放的实验室台面上开展工作。不要求一般也不使用特殊的抑制设备和设施(生物安全柜)。
                   2.2生物安全二级(BSL-2):适合于对人和环境有中度潜在危险的病源。与BSL-1的区别在于:实验人员均应接受过病源处理方面的特殊培训,并由有资格的工作者指导。进行实验时限制进入实验室。对于污染的锐器应特别注意。某些可能产生传染性气溶胶或飞溅物的过程应在生物安全柜中或其他物力抑制设备中进行,可选用级生物安全柜。
                   2.3生物安全三级(BSL-3):应用于临床、诊断、教学、研究或者生产设施,在该级别中开展有关内源性和外源性病原的工作。若因暴露而吸入该病原会引发严重的可能致死的疾病。实验人员应在处理致病性的可能使人致死的病原方面受过专业训练,并由对该病原工作有经验的有资格的科学工作者监督。所有与传染源操作有关的步骤都在生物安全柜或其他物理抑制装置中进行,最好选用二级或二级以上生物安全柜,实验室需要特殊设计和施工,室内为负压。
                   2.4生物安全四级(BSL-4)应用于对生命有高度危险的危险性病原或外源性病原。可通过气溶胶而致实验室感染或未知传染风险,且引起致命的有关病原,应选用三级生物安全柜及正压防护服,如SARS病毒对人或环境具有中度潜在危险,对携带该病毒的患者样本处理均应在生物安全二级(BSL-2)或二级以上实验室中进行,为了对操作人员和环境及样品均提供有效的保护,实验室应选用二级以上或全排风式生物安全柜(B2型)。
                  3、生物安全柜使用中应注意的问题
                  3.1对人员的管理
                  3.1.1 只有经过培训和指导的实验室工作人员才能操作该设备,未经培训人员一律不能使用。
                  3.1.2 禁止非工作人员进入实验室,禁止工作人员在操作设备时吸烟以及处理隐性眼镜等。
                  3.1.3 工作人员操作完成后应如实填写《使用记录》。
                  3.2 对设备的管理
                  3.2.1 对生物安全柜采用单独供电,以免其他设备发生意外导致生物安全柜失效。
                  3.2.2 设备顶部通风口不能被任何东西覆盖以保证排气通畅。
                  3.2.3设备出现报警时应停止使用,查明原因确保安全后再使用。如出现系统失效的讯号时,因空气不能被有效的过滤而不能继续使用该设备进行操作。
                  3.2.4更换空气过滤器时应与厂家工程师联系,并进行更换,实验室工作人员不能私自进行更换,以免操作不当造成对周围人员和环境的污染。
                  3.2.5 用过的过滤器必须放在密闭的容器中,并在明确的位置注明其可能含有危险的微生物,引起注意并进行特殊处理。
                  3.2.6新购置的生物安全柜在使用之前或维护重新移位以后必须由专业技术人员对生物安全柜的整体性能进行认证,每台生物安全柜应该至少每年进行一次测试和认证,以确保操作的安全。
                  3.2.7生物安全柜性能测试应包括:送风气流的速度和送风量的测试,进口处进风速度测试,气流烟雾流型试验,空气过滤器渗透试验,安全柜泄露试验,电器漏电和接地电阻及极性试验,光照强度试验,振动试验,噪音水平试验,紫外线灯测试等。
                  3.3 工作前的准备
                  3.3.1 在开始工作前要让生物安全柜封机至少运行3-5分钟,使安全柜内的空气进行净化。
                  3.3.2 安全柜的工作台面、内壁和观察窗的内表面用消毒剂擦拭,再用无菌蒸馏水进行擦拭,以清除残余的消毒剂。
                  3.3.3 放到生物安全柜内的容器和材料的表面应以75%的酒精擦拭,以减少将环境的杂菌带到安全柜内。
                  4、操作中的注意事项
                  4.1 操作人员必须做好个人防护后才能进行生物安全柜的操作。
                  4.2操作者先把手臂放入生物安全柜内大约一分钟,才能进行实验操作,这样可以使安全柜稳定并且能让气流清扫掉手臂表面的微生物污染。
                  4.3 所有的操作应该在距离前面的格栅四英寸里面的工作台面上进行,前面的格栅不能被任何物品阻挡。
                  4.4所有的材料应该放在距离安全柜前面的格栅和后面工作台面边缘尽可能远的位置,容易产生气溶胶的设备(如搅拌器、离心机等),应该靠近安全柜的后部放置。
                  4.5 操作时的动作应该从工作台面的清洁区到污染区,一般是从左侧到右侧(习惯于左手操作的人员相反)。
                  4.6在生物安全柜内如发生少量的喷洒时,应用污染清除吸收纸巾立即进行处理,并将使用过的纸巾放到生物危害包里,再用浸泡消毒液的毛巾立即进行擦拭消毒,如发生大量的溢出时,要求广泛的消毒,安全柜内的所有物品应该进行表面消毒,并拿出安全柜,使用消毒液的作用时间应维持在20-30分钟。 
                  4.7 生物安全柜内禁止使用酒精灯,使用酒精灯进行消毒接种工具容易发生危险,应使用电子高温灭菌设备。
                  4.8工作完成时所有容器和设备应进行表面消毒并拿出安全柜,对安全柜的台面、边缘、后壁和观察窗内侧进行擦拭、消毒。
                  4.9 工作人员离开实验室应摘下手套、脱下工作服并进行洗手。
                总之:临床实验室(包括HIV实验室)是一个对人类具有一定危险的工作场所,保护临床实验室的安全和人员健康是防止环境污染的第一步和首要工作。生物安全包括生物安全设施、生物安全设备、良好的病原微生物学操作以及严格的管理,而实验室生物安全设备的投入是其中不可缺少的一个环节,了解生物安全级别及其相关知识,正确选择生物安全柜及明确操作中的注意事项对于实验室做好安全防护工作保护工作人员的安全和健康,具有重要意义。

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